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諾如病毒分子檢測(cè)方案

更新時(shí)間:2021-01-14 點(diǎn)擊量:3212

諾如病毒是什么?

諾如病毒是一組形態(tài)相似、抗原性略有不同的病毒顆粒,諾如病毒感染性腹瀉在*范圍內(nèi)均有流行,全年均可發(fā)生感染,寒冷季節(jié)呈現(xiàn)高發(fā),學(xué)齡兒童是成為備受諾如病毒“寵幸”的對(duì)象。

需要注意的是,諾如病毒至今仍沒(méi)有疫苗和藥物!

 

諾如病毒的傳播途徑

1.可通過(guò)污染的食物、水源、物品、空氣等傳播。
2.食源性傳播是通過(guò)食用被諾如病毒污染的食物進(jìn)行傳播,牡蠣等貝類(lèi)海產(chǎn)品和生食的蔬果類(lèi)是引起諾如暴發(fā)的常見(jiàn)食品。
3.經(jīng)水傳播可由桶裝水、市政供水、井水等飲用水源被污染所致。

我國(guó)對(duì)諾如病毒的監(jiān)測(cè)工作

1.我國(guó)衛(wèi)生部門(mén)于2005年啟動(dòng)了病毒性腹瀉監(jiān)測(cè)工作,在部分省市開(kāi)展了生食動(dòng)物性水產(chǎn)品中諾如病毒的常規(guī)監(jiān)測(cè),以進(jìn)一步了解我國(guó)病毒性腹瀉流行病學(xué)規(guī)律、流行毒株特征,為制定有效的預(yù)防控制措施提供科學(xué)依據(jù)。
2.食品藥品監(jiān)管總局2014年和2015年都將諾如病毒作為檢驗(yàn)項(xiàng)目納入食品安全抽檢計(jì)劃,進(jìn)一步加強(qiáng)監(jiān)管工作。

 

諾如病毒的檢測(cè)方法

1.電鏡法 
包括直接電鏡法(EM)和免疫電鏡法(IEM)。
設(shè)備昂貴;靈敏度與特異性相對(duì)較低;對(duì)操作人員的專(zhuān)業(yè)性要求較高;
2.免疫法 
包括放射免疫法(RIA)、生物素-親和素免疫法(Biotin-Avidin Immunoassy)和酶聯(lián)免疫法(ELISA) 。
RIA的靈敏度要比IEM高10-100倍,但需要使用放射元素進(jìn)行標(biāo)記,且需要時(shí)間較長(zhǎng)(6d);Biotin-Avidin Immunoassy是美國(guó)疾病預(yù)防控制中心基于RIA建立的簡(jiǎn)化方法,靈敏度與RIA相近;ELISA具有靈敏度高、耗時(shí)少、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn),便于廣泛推廣,但株型特異性太強(qiáng),應(yīng)用范圍較狹窄。
3.分子生物學(xué)檢測(cè)方法
包括等溫核酸擴(kuò)增(NASBA)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)、熒光染料RT-PCR、熒光探針RT-PCR、多重RT-PCR等,是目前檢測(cè)諾如病毒應(yīng)用比較廣泛的方法,被稱(chēng)為檢測(cè)諾如病毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

GB 4789.42-2016《食品安全標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 諾如病毒檢驗(yàn)》中規(guī)定了食品中諾如病毒(Norovirus)的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)方法。

實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)法的優(yōu)勢(shì)

熒光探針RT-PCR通過(guò)特異性的熒光探針與引物,可實(shí)時(shí)監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程中特異性產(chǎn)物的變化,并且可以實(shí)現(xiàn)同一管中多個(gè)基因的檢測(cè)(多重),特異性較好,假陽(yáng)性率低,檢測(cè)靈敏度可達(dá)10-100拷貝/反應(yīng)。

旋達(dá)R1諾如病毒核酸檢測(cè)試劑

PCR-熒光探針?lè)▍⒄誈B 4789.42-2016開(kāi)發(fā)
產(chǎn)品家族
012111M/L   諾如病毒GⅠ核酸檢測(cè)試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span>
012121M/L   諾如病毒GⅡ核酸檢測(cè)試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span>
012112M/L   諾如病毒GⅠ核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>
012122M/L   諾如病毒GⅡ核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>
012132M/L   諾如病毒GI型、GII型核酸檢測(cè)試劑盒(雙色熒光探針?lè)ǎ?/span>

 

產(chǎn)品特點(diǎn)
操作簡(jiǎn)單、快速判讀
特異性強(qiáng)、靈敏度高

適用儀器
恒溫?zé)晒夥ㄟm用:ZYD-S1、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308c等恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀, ABI 7500,LightCycler480,CFX 96等熒光PCR儀。
PCR-熒光探針?lè)ㄟm用:ABI 系列、MJ 系列、Roche 系列、博日系列以及其它熒光定量PCR 檢測(cè)儀(可同時(shí)檢測(cè)FAM通道(494 nm)、VIC通道(538nm)、NED通道(546nm)三種通道的熒光定量PCR儀)。

產(chǎn)品性能指標(biāo)
陽(yáng)性參考品符合率:企業(yè)陽(yáng)性參考品檢測(cè)結(jié)果應(yīng)全部為陽(yáng)性,陽(yáng)性率為10/10;
陰性參考品符合率:企業(yè)陰性參考品檢測(cè)結(jié)果應(yīng)全部為陰性,陰性率為10/10;

產(chǎn)品應(yīng)用
國(guó)家、地方食品藥品監(jiān)督管理單位對(duì)抽樣食品中潛在的諾如病毒污染進(jìn)行快速檢測(cè)
出入境檢驗(yàn)檢疫部門(mén)對(duì)進(jìn)出口食品中諾如病毒的潛在污染情況進(jìn)行快速檢測(cè)與篩查
食品生產(chǎn)加工企業(yè)對(duì)產(chǎn)品中潛在諾如病毒的污染情況進(jìn)行快速檢測(cè)與篩查
重大活動(dòng)中的食品安全保障
食品安全突發(fā)事件的快速檢測(cè)等

 

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